アレルギー緩和試験

 

アレルギーとは、免疫反応が体に悪影響のない物質に対して過剰に起きることを指します。免疫反応は、外来性の異物(抗原)を排除する生体防御の役割を持ちますが、過剰な反応はアレルギーを引き起こします。このアレルギーの原因となる物質(抗原)をアレルゲンと呼びます。アレルギー性鼻炎を例としますと、アレルゲンの侵入により、鼻水、くしゃみ、鼻づまりなどの症状が生じます。これらのアレルゲンとしては、花粉やハウスダストなどが挙げられます。体内に入ったアレルゲンは、マスト細胞表面のIgEと結合します。IgEはアレルゲンを介して架橋され、その刺激によって、脱顆粒反応が生じます。顆粒の成分には、ヒスタミンを含むアレルギー反応を促進する物質が含まれ、くしゃみ、鼻水などのアレルギー反応が引き起こされます。

本試験では、培養液中にマスト細胞を培養し、アレルゲンによる脱顆粒を誘導します。この時、被験対象を加えることで、脱顆粒反応の抑制効果について解析を行います。検出対象としては、ヒスタミン、TNF-α、インターロイキンやβ-ヘキソサミニダーゼがあります。

ヒスタミン

ヒスタミンは顆粒成分の1種であり、アレルゲンに応答したマスト細胞より放出されます。ヒスタミンは血管内皮細胞,平滑筋,副腎髄質細胞,神経細胞などにあるヒスタミン受容体と結合することで、シグナル伝達経路を活性化します。その結果、各種アレルギー反応が誘導されます。

本アッセイでは、マスト細胞を培養し、アレルゲンによる脱顆粒を誘導します。この時、被験サンプルを加えることで、脱顆粒反応の抑制効果について解析を行います。ヒスタミン濃度は、ELISA法により、その放出量の変化を解析します。

【試験内容】
使用細胞:マスト細胞
測定項目:ヒスタミン
試験実施:被験サンプル(ご指定濃度:3~4段階,n=3)

TNF-α

TNF-αは顆粒成分の1種であり、アレルゲンに応答したマスト細胞より放出されます。

本アッセイでは、マスト細胞を培養し、アレルゲンによる脱顆粒を誘導します。この時、被験サンプルを加えることで、脱顆粒反応の抑制効果について解析を行います。TNFαは顆粒成分の一種であり、通常の免疫反応の場合には、好中球(白血球の一種)の移動を活発にすることで、生体防御に関与します。一方アポトーシス(細胞自死)の誘導活性を持っており、アレルギー反応の惹起や炎症反応の悪化を促すことがあります。

本アッセイては、TNFα濃度をELISA法により測定致します。

【試験内容】
使用細胞:マスト細胞
測定項目:TNFα
試験実施:被験サンプル(ご指定濃度:3~4段階,n=3)

インターロイキン

インターロイキン(Interleukin, IL)はは顆粒成分の1種であり、アレルゲンに応答したマスト細胞より放出されます。インターロイキンには非常に多くの種類が存在し、大きく4つのグループに分かれます。このうち、IL-4,IL-9, IL-13, IL-16などがマスト細胞で発現しています。インターロイキンは脱顆粒反応によって放出され、炎症反応をもたらします。インターロイキン放出量の抑制効果について検討することで、被験物質の抗炎症作用について解析を行えます。

本アッセイでは、マスト細胞を培養し、アレルゲンによる脱顆粒を誘導します。この時、被験サンプルを加えることで、インターロイキン産生について解析を行います。インターロイキン濃度は、ELISA法により、その放出量の変化を解析します。

【試験内容】
使用細胞:マスト細胞
測定項目:インターロイキン
試験実施:被験サンプル(ご指定濃度:3~4段階,n=3)

β-ヘキソサミニダーゼ

β-ヘキソサミニダーゼは顆粒成分の1種であり、アレルゲンに応答したマスト細胞より放出されます。β-ヘキソサミニダーゼは自身の酵素活性により呈色反応を誘導することができ、脱顆粒反応の定量に用いられます。

本試験では、培養液中にマスト細胞を培養し、アレルゲンによる脱顆粒を誘導します。この時、被験対象を加えることで、脱顆粒反応の抑制効果について解析を行います。βヘキソサミニダーゼの場合には、他の検出対象で用いるELISAではなく、基質を加えた際の呈色反応について解析を行います。ELISAに比べて、試験にかかる期間と費用を抑えることが可能です。

【試験内容】
使用細胞:マスト細胞
測定項目:βヘキソサミニダーゼ解析
本試験:被験サンプル(ご指定濃度, n=3)

 

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